Cómo reconstituir péptidos liofilizados: protocolo universal
El paso crítico que separa un experimento limpio de uno comprometido. Protocolo universal de reconstitución estéril.
¿Qué es la liofilización?
La liofilización (freeze-drying) elimina el agua de la molécula por sublimación al vacío, dejando un polvo estable durante años a 2–8 °C. Antes de cualquier uso, el péptido debe ser reconstituido con un diluyente estéril.
Diluyente recomendado
Agua bacteriostática (agua estéril + alcohol bencílico 0.9%) es el diluyente estándar. El alcohol bencílico actúa como conservador, permitiendo perforaciones múltiples del vial sin contaminación bacteriana hasta 28 días.
Cálculo de volumen
Concentración resultante = mg del vial ÷ mL de diluyente. Ejemplo: 5 mg ÷ 2 mL = 2.5 mg/mL. Volúmenes mayores facilitan la dosificación; menores aumentan la precisión.
Técnica estéril
- Equilibrar vial y diluyente a temperatura ambiente.
- Desinfectar tapones de goma con alcohol 70%.
- Inyectar el diluyente lentamente por la pared interna del vial.
- Rotar suavemente hasta disolución total. No agitar.
- Etiquetar con fecha de reconstitución y concentración.
Almacenamiento
Refrigerado a 2–8 °C, protegido de la luz. Evitar ciclos de congelación-descongelación. Vida útil post-reconstitución: 28–30 días dependiendo del péptido.